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炭疽毒素保护抗原(Cat#171E Anthrax Protective Antigen)
产品组成:
每瓶含0.6mg炭疽毒素保护抗原。用500ul水重悬后,为含0.6mg炭疽毒素保护抗原的0.005mol/L Hepes,0.05mol/L 氯化钠,pH7.4的缓冲液。温和操作,不要涡旋混匀。
产品保存:
产品为冻干粉,保存于2-8℃。 用水重悬后,保存于2-8℃,并在数小时内尽快使用。如果长期不用的话,保护抗原和致死因子在活细胞的中的活性会下降。如果必须保存溶液,请重悬至1mg/ml浓度,用1mg/ml的BSA重悬会增加蛋白的稳定性,可以分装-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。蛋白按以上浓度重悬后,加入50%冷的甘油,冷冻保存。用1mg/ml的BSA重悬2-8℃可以放2周。
浓度:
蛋白浓度通过测定1mg/ml溶液中280nm处吸光度(消光系数0.97)获得。
纯度:
经4-12% SDS-PAGE电泳,出现单一的分子量为83kDa的条带。光密度分析纯度>90%。
产品经内毒素检测,内毒素为:1EU/mg(每个批次可能不同个)
活化:
对于某些检测系统,此产品可能需要胰蛋白酶消化产生C端的63kD 片段。
细胞毒活性:
用0.5ug/ml的炭疽毒素保护抗原处理J774A.1细胞,检测不到毒性。当和炭疽毒素致死因子结合后,可以达到细胞毒活性要求。
组织培养应用:
对于组织培养,培养基中的谷氨酰胺必须是新鲜的。如果谷氨酰胺破坏会释放铵离子,会阻止核仁酸化,从而抑制炭疽毒素致死因子进入细胞浆。因此必须用:稳定性好的谷氨酰胺。
防护:
操作时,请穿上实验服,带上手套和防护眼镜。此产品仅供科研应用,不可用于诊断试剂。
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