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PLT VASP/P2Y12 流式检测试剂盒中文说明书
(以英文说明书为准)
产品名称 | 货号 | 规格 | 应用 |
PLT VASP/P2Y12 | 7014 | 10T | 利用双染流式细胞术,通过VASP的磷酸化作用,测定P2Y12受体活性。 |
1 简介:
血管扩张刺激磷蛋白(VASP)是一种重要的细胞内血小板蛋白,基础状态下处于非磷酸化状态。其磷酸化,是受cAMP (环磷酸腺苷) 级联调节。前列腺素E1(PGE1)会激活级联反应,然而这种级联调节通过P2Y12蛋白受体被ADP抑制。
在检测时,VASP的磷酸化与P2Y12受体抑制效应密切相关,而VASP的非磷酸化状态与P2Y12 受体激活相关。
噻氯匹定和氯吡格雷对血小板受体的抑制作用是不可逆的。这种效应通过PGE1的激活,同时ADP的加入,而使VASP保持磷酸化,而被证实。
本试剂盒利用双色流式细胞测定术,通过VASP的磷酸化状态的测定,从而检测P2Y12受体活性。
2 方法:
先将全血单独与PGE1孵育或与PGE1+ADP混合孵育。细胞渗透后,处于磷酸化状态的VASP通过间接免疫荧光反应特异性的被单克隆抗体标记。使用双色流式细胞分析测定单独PGE1激活的和PGE1联合ADP处理管的校准平均荧光强度(mean fluorescence intensities,MF1),经减去空白对照得到校正后的MFIc,即减去阴性对照之后的平均荧光强度。再计算血小板反应指数(Plaet reactivity index,PRI),即VASP磷酸化水平,评估标本中ADP抑制VASP磷酸化的程度。
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