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高浓度HC Matrigel基底膜基质胶
BD产品货号:354248 354262
储存和运输:-20℃储存,干冰运输。
产品特性:
Matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色),是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的,但是与5%CO2平衡后即会减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行,试剂瓶盖可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。
细胞可在0.5 mm厚度的Matrigel基质层表面生长,也可在1 mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层,可以用于细胞贴壁,但不能用于细胞的分化研究。
注意:可将冻融后的Matrigel分装在多个小管,所有分装均需用预冷的冻存管,迅速冷冻并保存,避免多次冻融。
Matrigel在25-35℃温度环境下快速成胶,因此溶解时在4℃冰上overnight冻融(4度时会随着温度的上升部分成胶)。成胶后的Matrigel可以在4℃ 24-48小时后重新呈液态。
注射步骤:
注射前,必须保证Matrigel细胞悬浮液在不冷冻的情况下,尽可能地保持低温,同时保证每一步都无菌操作。对于每只注射小鼠,冰上混合0.5 mL细胞(2×105或更多细胞)和 Matrigel混合液。细胞注射体积需尽可能小。通常,用含有2×106/mL细胞的250 μL预冷培养基,混合250 μL冰浴的Matrigel。小鼠皮下注射,19G针用于组织样品,23G针用于培养的细胞。注射动作必须快速,以避免Matrigel凝固。抽出注射器时旋转以防止泄漏。针头需要经常更换以避免堵塞。用BD细胞回收剂(354253)或离散酶(354235)可降解Matrigel基质,冰浴7小时后回收得到细胞。