小鼠肾炎模型诱导方案

小鼠肾炎模型诱导方案

免疫复合物肾小球肾炎（IGGN）模型简介：

肾小球肾炎是指一系列由免疫应答介导的导致肾小球炎症。膜性肾病和膜性肾小球肾炎是人类肾病综合征最常见的病因。膜性肾病的特征是由免疫复合物沿着基底膜与内皮细胞之间的间隙沉积，导致基底膜增厚激活补体。激活的炎症级联导致肾功能受损，包括蛋白尿和肾功能衰竭。有研究报道用大鼠膜性肾病模型（Heymann肾炎），研究人膜性肾病，尽管Heymann肾炎覆盖了人膜性肾炎的很多方面，但是使用大鼠作模型有很多缺点。小鼠膜性肾炎模型是研究膜性肾病发病机制和开发靶向治疗的重要研究工具。Wayne et al.等研究用cBSA可诱导兔膜性肾病症状。另外，已有研究用cBSA在狗、猫、兔等动物成功诱导免疫复合物肾小球肾炎模型。Chen et al,将这一模型用于小鼠，称为：免疫复合物肾小球肾炎（IGGN）模型。

人的膜性肾病是由免疫复合物沿着基底膜与内皮细胞之间的间隙沉积而引起的。沉积的免疫复合物激活补体，导致基底膜变厚。对于小鼠ICGN模型，用cBSA反复免疫小鼠。带正电荷的cBSA与带负电荷的基底膜（GBM）结合。抗cBSA抗体（主要是IgG1）与cBSA产生的免疫复合物，导致人膜性肾病出现多种症状，如：基底膜增厚，低蛋白血症和蛋白尿。这种发病机制，同样适用在儿童膜性肾病。

操作流程：

动物品系：

Balb/c and ICR小鼠（≥7-8周龄，雄性或雌性都可以）,C57BL/6小鼠不能诱导产生该模型。

乳剂制备：

用cBSA和CFA弗氏佐剂（cat#7008, 1mg/ml）等体积混合

注意：

制备乳剂后请检测乳剂质量，滴一滴到水中不扩散，说明乳剂质量良好，反之，重新混匀，直到为油包水状态。

免疫方法

小鼠尾根部皮下免疫100ul乳剂（cBSA 0.1mg）

肾炎诱导

2周后，静脉注射200ul(400ug) cBSA(2 mg/ml)，每隔一天重复免疫，一共免疫5次。

注意

静脉注射cBSA，导致小鼠过敏反应，有可能会导致小鼠死亡。为了避免这种情况发生，初次免疫剂量要小一些（50-100ug cBSA）,在随后的2-5次免疫逐渐增加剂量到400ug。

肾炎评估：

通过检测小鼠16小时尿中尿蛋白含量评价肾炎严重程度。推荐使用chondrex 公司小鼠白蛋白检测试剂盒（cat#3012）

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